Wat Is celcyclusanalyse?

Celcyclus analyse is een techniek die wordt gebruikt in biochemisch onderzoek te identificeren en de fase van een biologische cel analyseren. Tijdens de levensduur van een cel passeert door een reeks cyclische fasen die gezamenlijk bekend als de celcyclus. De hoeveelheid desoxyribonucleïnezuur (DNA) in de cel verandert op basis van de fase. In celcyclus analyse wordt DNA van de cel gekleurd met een fluorescente kleurstof, waardoor onderzoekers om te bepalen hoeveel van de DNA aanwezig en waar de cel in zijn cyclus.

De celcyclus bestaat uit twee grote fasen: interfase en mitose. Interfase bestaat voorbereiding van de deling van de cel of mitose, ook wel de M-fase. Het grootste deel van de levenscyclus van de cel wordt besteed aan de voorbereiding voor de mitose, dat is kort door vergelijking, dus interfase is onderverdeeld in drie delen: G1-fase, de S-fase en de G2-fase.

In G1, de cel is vooral bezig met de groei. Tijdens de S-fase, wordt genetische informatie van de cel in de vorm van DNA gerepliceerd ter voorbereiding van de splitsing in twee dochtercellen. In G2, de cel bereidt deling, die leidt naar de M-fase. Na mitose, de cel terug naar de sectie G1 van interfase en de cyclus begint opnieuw. Cellen die om wat voor reden stoppen met delen verlaten de cyclus bestaan ​​inert in zogenaamde de G0-fase.

De cel repliceert het DNA tijdens de S-fase, zodat er tweemaal zoveel DNA in de cellen in G2 en M dan er in G1 en G0. Onderzoekers deze informatie gebruiken celcyclus analyse om de celfase bepalen. Celcyclus kan eveneens afwijkingen in cellulair DNA onthullen.

De techniek die in celcyclusanalyse heet flowcytometrie. Eerst wordt een fluorescente kleurstof in de cel die de DNA-moleculen vlekken door chemische binding aan hen. Onderzoekers vervolgens een instrument genaamd cytometer de intensiteit van fluorescentie van de cel te bepalen. Een hogere fluorescentie geeft aan dat meer kleurstof kon binden, en dat blijkt dat er meer DNA in de cel.

Meestal wordt celcyclusanalyse gebruikt op een groepering van cellen. Een type diagram genoemd histogram wordt gegenereerd uit de gegevens, waarop vaak twee afzonderlijke pieken: een die de populatie van cellen in de G1-fase toont, en andere - het dubbele - vermeldt die in de G2-fase. De G2-fase piek tweemaal zo hoog, omdat de cellen in die populatie bevatten twee keer zoveel DNA als in de G1 piek. Cellen die in de S-fase, die nog in het proces van replicerende DNA, weergegeven in de grafiek op een tussenniveau tussen de twee pieken.

  • De fasen van mitose.
  • De hoeveelheid DNA in de cel verandert op basis van de levenscyclus van de cel.